本發(fā)明涉及一種大孔徑的多孔質粒子以及使用其的高處理速度下的色譜技術。
背景技術：
1、在用于生物醫(yī)藥品等的分離、精制的色譜中，由于多孔質粒子具有大的表面積，因此作為結合容量高的材料被利用。近年來，進行了如下努力：通過將多孔質粒子的細孔設為連續(xù)孔，粒子內部的連通孔的空隙也可作為吸附部位利用(專利文獻1、專利文獻2、專利文獻3)。另外，以往的多孔質粒子為了抗體、蛋白質、核酸等通常為5nm～10nm范圍的尺寸的生物體分子的分離而進行了最優(yōu)化，與此相對，為了增大病毒等更大的粒子的結合容量，進行了如下努力：通過增大多孔質粒子的細孔徑而可在細孔內吸附大的粒子(專利文獻4)。
2、近年來，為了提高生物醫(yī)藥品等的生產性，每單位時間使目標物質結合的能力受到關注。所述能力是以每單位體積、每單位時間結合的目標物質量(mg/ml/min)表示，其會有助于減少用于分離、精制的色譜吸附材料和/或縮短分離、精制所需的時間。在以往的向多孔質粒子的結合中，目標物質向粒子的孔內的擴散成為限速，因此特別是在滯留時間低于1分鐘的高處理速度下，若為了縮短向填充有粒子的管柱的滯留時間而提高流速，則目標物質向粒子的結合容量顯著降低，因此存在流速的提高不會有助于提高生產性的問題。作為解決此種高處理速度下的結合容量降低問題的方法，已知有使用膜(membrane)或整料(monolith)、纖維來代替多孔質粒子的色譜精制法。在此種材料中，由于液體通過廣泛打開的纖維之間，因此不易達到擴散限速，具有可減小結合容量的流速依賴性的特征。然而，膜或整料、纖維無法填充到以往使用的管柱中，存在需要專用的容器的問題。另外，若使用膜或整料、纖維，則存在堵塞時壓力會急劇上升的問題。
3、現有技術文獻
4、專利文獻
5、專利文獻1：國際公開第2016/013568號
6、專利文獻2：國際公開第2017/026424號
7、專利文獻3：日本專利特開2020-026511號公報
8、專利文獻4：日本專利特表2022-515769號公報
9、專利文獻5：國際公開第2015/029790號
10、非專利文獻
11、非專利文獻1：w.m.迪恩、f.g.史密斯iii(w.m.deen,f.g.smith?iii)、《膜科學雜志(j.membr.sci.)》1982,12,217-237
12、非專利文獻2：p德菲利普斯、a?m倫霍夫(p?dephillips,a?m?lenhoff)、《色譜雜志a.(j?chromatogr?a.)》2000,883,39-54
技術實現思路
1、發(fā)明所要解決的問題
2、如上所述，為了提高生物醫(yī)藥品等的分離、精制效率，可在提高每單位體積、每單位時間結合的目標物質量(生產性)的同時，有效利用作為以往的設備的填充管柱，要求堵塞風險小的精制法。
3、因此，本發(fā)明的課題在于提供一種用以使用將填充劑填充到管柱中的以往的裝置來進行高處理速度下的生物醫(yī)藥品等的精制的技術。
4、解決問題的技術手段
5、本發(fā)明人等人為了解決所述課題而進行了努力研究，結果發(fā)現具有三維網狀的骨架及包含其空隙的特定的連通孔結構且具有較大的連通孔的多孔質粒子，且發(fā)現通過將所述多孔質粒子作為色譜載體使用，即使在高流速條件下也可維持高吸附量，從而完成了本發(fā)明。
6、即，本發(fā)明如以下所述。
7、[1]一種多孔質粒子，其特征在于，
8、其為大致球狀，具有三維網狀的骨架及包含其空隙的連通孔結構，且所述連通孔從粒子表面貫通到內部，
9、在將所述多孔質粒子填充到內徑0.78cm、長度30cm的管柱中，將純水作為流動相，以25℃的管柱溫度及0.4ml/分鐘的流量通入包含5mg/ml的粒徑100nm的二氧化硅微粒子的漿料時，所述二氧化硅微粒子的保持時間為15.0分鐘以上。
10、[2]根據[1]所述的多孔質粒子，其特征在于，細孔徑為650nm以上。
11、[3]一種多孔質粒子，由配體修飾，所述多孔質粒子的特征在于，
12、其為大致球狀，具有三維網狀的骨架及包含其空隙的連通孔結構，且所述連通孔從粒子表面貫通到內部，
13、細孔徑為400nm以上。
14、[4]根據[1]至[3]中任一項所述的多孔質粒子，其中，主要成分為乙酸纖維素或纖維素。
15、[5]根據[1]至[4]中任一項所述的多孔質粒子，其中，中值粒徑為40μm～200μm。
16、[6]根據[1]至[5]中任一項所述的多孔質粒子，其中，基于布厄特(brunauer-emmett-teller，bet)多點法所得的比表面積為1m2/g～200m2/g。
17、[7]根據[1]、[2]及[4]至[6]中任一項所述的多孔質粒子，其中，對根據[1]或[2]所述的多孔質粒子進行配體修飾。
18、[8]根據[3]或[7]所述的多孔質粒子，其中，所述配體為選自由包含離子交換基的配體、親和配體及包含疏水性基的配體所組成的群組中的一種以上。
19、[9]一種液相色譜載體，包含根據[1]至[8]中任一項所述的多孔質粒子。
20、[10]一種液相色譜裝置，包含填充有根據[9]所述的液相色譜載體的分離管柱。
21、[11]一種分離精制方法，為生物體高分子的分離精制方法，
22、包含使用根據[10]所述的液相色譜裝置對生物體高分子進行分離精制的工序。
23、[12]根據[11]所述的分離精制方法，其中，所述生物體高分子的大小為1nm～100nm。
24、[13]根據[11]或[12]所述的分離精制方法，其中，所述生物體高分子為抗體。
25、發(fā)明的效果
26、根據本發(fā)明，在生物體高分子等目標物質的分離、精制時，即使在高流速條件下也可實現大的吸附容量。
1.一種多孔質粒子，其特征在于，
2.根據權利要求1所述的多孔質粒子，其特征在于，細孔徑為650nm以上。
3.一種多孔質粒子，由配體修飾，所述多孔質粒子的特征在于，
4.根據權利要求1至3中任一項所述的多孔質粒子，其中，主要成分為乙酸纖維素或纖維素。
5.根據權利要求1至3中任一項所述的多孔質粒子，其中，中值粒徑為40μm～200μm。
6.根據權利要求1至3中任一項所述的多孔質粒子，其中，基于布厄特多點法所得的比表面積為1m2/g～200m2/g。
7.根據權利要求1或2所述的多孔質粒子，其中，對如權利要求1或2所述的多孔質粒子進行配體修飾。
8.根據權利要求7所述的多孔質粒子，其中，所述配體為選自由包含離子交換基的配體、親和配體及包含疏水性基的配體所組成的群組中的一種以上。
9.一種液相色譜載體，包含如權利要求1至3中任一項所述的多孔質粒子。
10.一種液相色譜裝置，包含填充有如權利要求9所述的液相色譜載體的分離管柱。
11.一種分離精制方法，為生物體高分子的分離精制方法，
12.根據權利要求11所述的分離精制方法，其中，所述生物體高分子的大小為1nm～100nm。
13.根據權利要求11所述的分離精制方法，其中，所述生物體高分子為抗體。